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CCMP88-RD-033 進行性肌肉萎縮症中藥療效之評估-肌胚細胞培養及動物實驗之研究(2-2)

  • 資料來源:中醫藥司
  • 建檔日期:88-08-28
  • 更新時間:109-04-06

進行性肌肉萎縮症中藥療效之評估-肌胚細胞培養及動物實驗之研究(2-2)

陳順勝
高雄醫學院
本研究計畫重點在於嚐試以中藥來治療杜顯型及貝克型進行性肌肉萎縮症,先以動物模式來進行。兩者由於基因缺陷導致肌肉內dystrophin缺乏,因此矯正基因缺陷和補充缺陷蛋白質成為本病的治療方針。Dystrophin基因療法與細胞療法成為此症的希望。而細胞療法即將肌胚細胞(myoblast)移植入病肌內並使正常肌細胞與疾病肌細胞融合,恢復產生dystrophin能力成為探索本病治療的權宜新技術。肌胚細胞療法仍有許多侍解決之困難處如細胞培養技術的建立、移植後的組織排斥現象等等,目前的問題在於如何改善肌胚細胞培養之量產及如何在移植後增加肌胚細胞之存活率,因而我們提本研究計劃在上述兩方面我們都想借助於中藥之療效。在本研究若先在動物實驗有成果將進一步用於病人,將以中藥直接治療或配合肌胚細胞移植或基因療法進行之,後者將以中藥改善培養技術再進行。

研究將分實驗動物直接以中藥治療及動物肌胚細胞移植實驗模式之中藥療效兩大部份動物實驗選擇先天性缺乏肌肉dystrophin之X-linked Murine Muscular Dystrophy (MDX)小鼠。

1.進行性肌肉萎縮症小鼠之中藥療效評估

A.第一年:以複方為主方選健步虎潛丸通經活絡滋陰壯骨、蔘苓白朮散益氣健脾、人蔘養榮湯益氣補血、補中益氣湯補中益氣升陽舉陷、六味地黃丸滋補肝腎、補陽還五湯補虛通絡、左歸丸補肝腎益精血、右歸丸溫腎陽補陰血、龜鹿二仙膠益養血等複方測試對進行性肌肉萎縮症小鼠之療效。已交叉使用九種種中要複方測試MDX肌肉萎縮症小鼠之療效。治療前以動物活動量量化儀評估運動功能已完成。在活動量量化儀的十五項參數中,B-l0與MDX有統計差異,此項結果與MDX肌肉會開始萎縮及再生。另外,在部份複方測試的MDX小鼠的活動量有中等程度的改善,可能有意義的包括運動總距離及垂直運動時間之延長,與休息時間之縮短。

B.第二年:以複方常使用之中藥為主藥選黃耆、人蔘、枸杞、山藥及可興奮骨骼肌收縮張力之三七分別進行動物之藥物投與對進行性肌肉萎縮症小鼠之療效。

A與B 之治療前後以動物活動量量化儀評估其運動功能改善情形,

2.中藥對動物肌胚細胞移植療效之評估及移植技術條件之改善。

A.中藥對肌胚細胞培養量產之療效: 第一年:以複方為主,以複方中藥對肌胚細胞培養量產之療效: 正常及MDX肌胚細胞之生長基本資料已完成,以九種複方中藥對肌胚細胞培養量產之療效研究大部份已完成。藉著操控一些分離肌胚細胞的技術及培養狀況,我們可得到正常及MDX純度約70%的肌胚細胞。從肌胚細胞的生長動力學分析其增殖能力及倍增時間,並從細胞型態上的證據觀察肌胚細胞分化的能力,結果發現肌胚細胞的融合是隨著培養時間而漸進的;另外我們也以肌縮蛋白免疫染色不同培養時間內的肌胚細胞,顯示所分離出來的肌胚細胞是有能力融合且可產生肌縮蛋白的正常肌胚細胞MDX小鼠肌胚細胞之生長略差,肌融合能力亦較差。

第二年:以複方常使用之單方藥為主,評估對肌胚細胞培養量產之療效。

A.中藥對動物肌胚細胞移植療效之評估: 第一年:以複方為主,計劃進行中。

第二年:以複方常使用之單方藥為主,評估對基因治療之療效。

3.進行性肌肉萎縮症病人之中藥治療評估 (將來計畫)

如第一、二年動物實驗結果有療效後,再進行進行性肌肉萎縮症病人之中藥治療研究將包括:A. 進行性肌肉萎縮症病人之中藥療效評估; B. 中藥對病人肌胚細胞移植療效之評估及移植技術條件之改善;C中藥對人類肌胚細胞培養量產之療效。

關鍵字:進行性肌肉萎縮症、傳統藥物治療、肌胚細胞培養

Effective of Chinese Myotropic Herbs on Progressive Musclar Dystrophy

Shun-Sheng Chen
Department of Neurology, Kaohsiung Medical College
A therapeutic trial of classical herb drugs on the dystrophin deficiency muscular dystrophy is designed by animal model. Dystrophin deficiency muscular dystrophy is caused by a deficiency of dystrophin protein due to deletion or point mutation of Xp2l at X-chromosome. Theoretically, gene therapy will be the treatment of choice in these patients, however not yet available because of technological problems. Clinical trial of herb drugs on these patients are worthy to be conducted﹒

This project will be divided into two stages : the first stage : trials of herb drugs on MDX (X-linked murine muscular dystrophy mice ; and the second : trials of herbs on Duchenne or Becker type dystrophic patients. During the two-year period of the first stage, the following process will be performed :

The first year: Therapeutic trials of compound herb formulars on dystrophin deficiency MDX mice.

The second year: Therapeuitc trilas of single herb drugs on dystrophin deficiency MDX mice.

關鍵字:Progressive muscular dystrophy ; Herb drugs ; myoblast culture ; MDX mice